慢性不可预测温和应激(CUMS)诱导抑郁症大鼠模型建立流程
发布时间:2025-09-30
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作者:东极药物
慢性不可预测温和应激(CUMS)诱导抑郁症大鼠模型建立流程实验动物及环境1. 动物选择:选取6-8周龄,体重180-220g的健康雄性SD大鼠,大鼠应来源于正规实验动物供应商,有合格的动物质量检测报告 。2. 环境条件:实验···
慢性不可预测温和应激(CUMS)诱导抑郁症大鼠模型建立流程
实验动物及环境
1. 动物选择:选取6-8周龄,体重180-220g的健康雄性SD大鼠,大鼠应来源于正规实验动物供应商,有合格的动物质量检测报告 。
2. 环境条件:实验动物饲养环境温度维持在(22±2)℃,相对湿度(50±10)%,12小时光照/12小时黑暗循环。大鼠在实验环境中适应性饲养1周,自由进食和饮水。
实验材料与设备
1. 材料:正常大鼠饲料、蔗糖、苦味剂(如黄连素溶液)。
2. 设备:鼠笼、代谢笼、电子秤、旷场实验箱、高架十字迷宫、强迫游泳实验装置。
造模前准备
1. 蔗糖偏好实验:实验前,给大鼠提供1%蔗糖溶液适应24小时,随后禁食禁水12小时。之后同时给予1%蔗糖溶液和纯水,2小时后测量两瓶溶液的消耗量,计算蔗糖偏好百分比 。公式为:蔗糖偏好百分比=蔗糖溶液摄入量/(蔗糖溶液摄入量+纯水摄入量)×100%。
2. 行为学测试:包括旷场实验、高架十字迷宫实验、强迫游泳实验,记录各项行为学指标作为基础数据。旷场实验观察大鼠的水平运动距离、垂直运动次数;高架十字迷宫记录大鼠在开臂和闭臂的停留时间、进入次数;强迫游泳实验记录大鼠的不动时间。
造模过程
1. 应激刺激:连续进行21天慢性不可预测温和应激刺激。应激刺激包括禁食24小时、禁水24小时、潮湿环境(在鼠笼底部铺湿垫料,厚度约1cm,持续24小时 )、昼夜颠倒(将正常光照周期颠倒,持续24小时)、45°倾斜鼠笼(持续24小时)、夹尾刺激(用止血钳夹大鼠尾巴尖端1/3处,力度以大鼠出现挣扎反应为准,每次持续30秒,共3次,每次间隔10分钟)、陌生环境暴露,这些刺激随机安排,每天给予一种,避免大鼠产生适应性。
2. 每周监测:每周进行一次体重测量和蔗糖偏好实验,观察大鼠体重变化和糖水偏好情况。正常大鼠体重逐渐增加,而模型大鼠体重增长缓慢或下降,蔗糖偏好百分比也会显著降低。
造模后评估
1. 行为学测试:造模21天后,再次进行旷场实验、高架十字迷宫实验、强迫游泳实验。与造模前数据对比,若大鼠水平运动距离和垂直运动次数明显减少、在高架十字迷宫开臂停留时间和进入次数降低、强迫游泳不动时间显著延长,表明造模成功。
2. 生物学指标检测:可进一步检测大鼠脑内神经递质
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